PROCEDIMIENTO:
Medirá la producción de oxígeno gaseoso a medida que se destruye el peróxido de hidrógeno por la acción de la enzima cuando se utilizan distintas concentraciones de etanol.
Soluciones propuestas
0. Solución con etanol al 0 %
3. Solución con etanol al 10 %
4. Solución de etanol al 40%
1.- Etiquetar y numerar los tubos de ensaye.
2.- Cortar trozos de 5 g de papa
3.- Proceder a macerar las muestras de papa.
4.- Colocar las muestras de papa pollo maceradas en los tubos de ensaye.
5.- Instalar el equipo del sensor de presión.
6.- Iniciar una a una, las reacciones químicas esperadas, agregando agua oxigenada, a cada una de las muestras bajo estudio.
7.- Proceder a medir las variaciones de presión concentración de Oxígeno de cada una de las muestras.
6.- Observar y describir el efecto de cada una de las reacciones durante 5 minutos.
7.- Llevar un registro de todos los cambios observados.
8.- Obtener una a una las gráficas correspondientes.
9.- Comentar y analizar los resultados obtenidos.
10.- Elaborar conclusiones.
Conecte el sensor de presión de gas a la interfaz para computador. Prepare la interfaz para la recolección de datos.
3. Conecte el tubo plástico a la válvula en el sensor de presión de gas.
Parte I Ensayo del Efecto de la concentración de la Enzima
4. Coloque cuatro tubos de ensayo en la gradilla y etiquetarlos como 1, 2, 3, y 4. Llene parcialmente un vaso de precipitado con agua corriente para usarlo en el Paso 5.
5. Añada 3 mL de agua y 3 mL de H2O2 al 3% a cada tubo.
6. Usando una pipeta de goteo limpia, añada 1 gota de suspensión de enzima al Tubo de Ensayo 1. Nota: Asegúrese que la enzima no caiga por los lados del tubo de ensayo.
Frasco
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H202 (ml)
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H2O(ml)
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Etanol (ml)
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0
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10 ml
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10 ml
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0 ml
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3
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10 ml
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9 ml
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1 ml
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4
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10 ml
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6 ml
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4 ml
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7. Coloque el tapón en el tubo de ensayo y agítelo bien para lograr la mezcla completa del contenido. Debe comenzar la reacción. El próximo paso debe realizarse lo más pronto posible.
8. Conecte el extremo libre del tubo de plástico al conector en el tapón de goma según se muestra en la Figura 3. Haga clic en el botón Iniciar toma de datos para comenzar la adquisición de datos. La toma de datos terminará en 3 minutos.
9. Si la presión excede el valor 130 kPa, la presión dentro del tubo será demasiado alta y el tapón saltará destapando el tubo. Desconecte el tubo plástico del sensor de presión de gas si la presión excede el valor de 130 kPa.
10. Una vez terminada la adquisición de datos, desconecte el conector del tubo plástico del tapón de goma. Retire dicho tapón del tubo de ensayo y deseche el contenido en un vaso de precipitado de desperdicios.
11. Encuentre la velocidad de la actividad enzimática:
a. Mueva el puntero del mouse hasta el lugar donde los datos comienzan a aumentar su valor. Mantenga presionado el botón del mouse. Arrastre el puntero del mouse hasta el punto donde los valores de la presión no aumenten más y suelte dicho botón.
b. Haga clic en el botón Ajuste Lineal , para realizar la regresión lineal. Aparecerá una caja flotante con la fórmula de la línea del mejor ajuste.
c. Registre la pendiente de la línea, m, como la velocidad de la actividad enzimática en la T
